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ISO 27871:2011(IDF 224:2011)规定了测定奶酪和加工奶酪中含氮组分的方法。该标准对于表征从牛奶凝结到成熟整个奶酪制作过程中蛋白质的组成变化至关重要。含氮组分——总氮(TN)、非酪蛋白氮(NCN)、非蛋白氮(NPN)和酪蛋白氮——提供了奶酪成熟度、质量和营养价值的关键指标。
本标准定义的组分分离方案能够精确跟踪奶酪成熟过程中的蛋白质水解过程。随着奶酪老化酪蛋白逐渐分解为肽和氨基酸使氮从酪蛋白组分转移到NPN组分。这种蛋白质水解指数(NPN/TN比率)是陈年奶酪的关键质量参数。
| 组分 | 定义 | 分离方法 | 占TN的典型比例 |
|---|---|---|---|
| 总氮(TN) | 所有含氮化合物 | 凯氏定氮或杜马斯法 | 100% |
| 非酪蛋白氮(NCN) | 乳清蛋白+NPN | pH 4.6沉淀 | 15-25% |
| 非蛋白氮(NPN) | 肽、氨基酸、尿素 | 12% TCA沉淀 | 1-15% |
| 酪蛋白氮 | TN – NCN | 差减法 | 75-85% |
| 乳清蛋白氮 | NCN – NPN | 差减法 | 10-20% |
标准规定了两种沉淀方法。方法A使用pH 4.6等电沉淀法将酪蛋白与乳清蛋白分离。方法B使用12%三氯乙酸沉淀所有蛋白质仅留下低分子量含氮化合物。各组分的氮含量通过凯氏定氮法或杜马斯燃烧法测定。
NPN/TN比率从新鲜凝乳中的约1-3%增加到完全成熟硬质奶酪中的15-30%。监测该比率可以精确控制成熟时间和条件。对于加工奶酪制造酪蛋白与乳清蛋白的比例决定了融化特性——酪蛋白含量越高产品越硬流动性越低。