Physical Address
304 North Cardinal St.
Dorchester Center, MA 02124
BS EN ISO 07899——水质 肠道肠球菌检测与计数标准系列（小型化最大概率数法与膜过滤法）
Water Quality — Detection and Enumeration of Intestinal Enterococci（Part 1: Miniaturized MPN Method，Part 2: Membrane Filtration Method）
💧 BS EN ISO 7899 规定了水质中肠道肠球菌（intestinal enterococci，旧称粪链球菌/粪肠球菌）的检测与计数方法，是评价水体受粪便污染程度的重要微生物学指标。肠道肠球菌是人及温血动物肠道内的正常菌群，在水中的存在可指示水源受到人畜粪便污染，且其对环境有一定耐受性，是水质卫生学评价与废水处理效果监测的常用指示菌。该系列在英国由技术委员会 EH/3（水质）下属分委员会 EH/3/4（微生物学方法）负责转化实施，属于对 ISO 7899 与 EN ISO 7899 的英国官方采纳版本，ICS 号为 07.100.20。系列分为两个部分，并作为 BS 6068 水质标准的组成部分。
💡 肠道肠球菌是水质监测的重要「指示菌」：相比大肠菌群，它对环境更具抵抗力，能更稳定地指示粪便污染，适用于淡水、海水、废水及娱乐用水等多种水体的卫生学评价。
一、标准系列概述与适用范围 📌
本系列适用于各类水体中肠道肠球菌的检测与计数：
- BS EN ISO 7899-1:1999（小型化最大概率数法）：规定采用小型化最大概率数（MPN）法检测和计数地表水与废水中的肠道肠球菌。
- BS EN ISO 7899-2:2000（膜过滤法）：规定采用膜过滤法检测和计数各种水体（包括饮用水、地表水、海水等）中的肠道肠球菌。
两个方法均以选择性培养基与确认试验为基础，通过培养后特征性菌落或阳性反应来定性/定量肠道肠球菌。该系列被赋予 BS 6068-4.3 与 BS 6068-4.4 的次级编号，纳入英国水质标准体系。
⚠️ 本系列方法应仅由具备相应微生物学专业资质与操作技能的人员执行，并全程遵循标准微生物学操作程序，防止污染与假阳性/假阴性。
二、系列构成与技术要点 🔢
| 标准号 | 标题（英文） | 方法 | 适用水体 |
|---|---|---|---|
| BS EN ISO 7899-1:1999 | Water quality — Detection and enumeration of intestinal enterococci — Part 1: Miniaturized method (Most Probable Number) for surface and waste water | 小型化 MPN 法 | 地表水、废水 |
| BS EN ISO 7899-2:2000 | Part 2: Membrane filtration method | 膜过滤法 | 饮用水、地表水、海水等 |
MPN 法适用于细菌浓度较低或含悬浮物较多的水体（通过多管/多孔板稀释培养估测最可能数）；膜过滤法适用于可过滤、细菌浓度适中的水体（通过过滤富集后直接计数菌落）。
三、检测原理与关键步骤 🎯
检测的基本流程包括：
- 样品采集与保存：无菌采样，低温保存并在规定时间内完成分析，避免细菌增殖或死亡导致结果失真。
- 选择性富集/培养：使用含抑制剂的肠道肠球菌选择性培养基，抑制非目标菌群，促进肠球菌生长。
- 确认试验：对疑似菌落或阳性孔进行确认（如胆盐七叶苷试验、革兰染色、过氧化氢酶试验等），排除假阳性。
- 结果计算：MPN 法由阳性孔/管组合查表得最大概率数；膜过滤法直接计数特征性菌落，以每 100 mL 或每 100 mL 的菌落形成单位（CFU）表示。
🚨 确认试验不可省略：许多非肠球菌的革兰阳性球菌能在选择性培养基上生长并形成类似菌落，若不确认会造成假阳性，导致水质误判与不必要的处理措施。
四、质量控制与结果表示 📊
微生物检测需严格控制质量：
- 空白对照：随行空白（无菌水）与培养基空白，排除污染与试剂干扰。
- 阳性/阴性对照：用已知肠球菌菌株与阴性菌株对照，验证培养基与方法的有效性。
- 平行测定：必要时做平行样，检查方法精密度。
- 结果表示：膜过滤法以 CFU/100 mL 表示；MPN 法以 MPN/100 mL 表示，并注明方法的检出限与置信限。
✅ 推荐做法：在饮用水与游泳水等敏感水体监测中，将肠道肠球菌与大肠菌群、菌落总数等指标联合使用，综合判断水体卫生状况与污染来源。
五、工程实践应用 🛠️
- 🔍 饮用水与娱乐用水监测：评价饮用水、游泳水、浴场水体的微生物卫生质量。
- 📊 废水处理效果评价：监测污水处理前后肠道肠球菌浓度，评估消毒与处理工艺效果。
- 📋 水源污染溯源：结合其他指示菌，判断水源是否受人畜粪便污染及污染来源。
- 🔧 环境监测与执法：为水质法规与标准执行提供微生物学数据支撑。
六、常见问题解答 ❓
❓ 问：肠道肠球菌与大肠菌群有何区别？
答：两者都是粪便污染指示菌，但肠道肠球菌对环境耐受性更强、存活更久，适合评价长期污染与海水、娱乐用水；大肠菌群更适合指示近期污染。
答：两者都是粪便污染指示菌，但肠道肠球菌对环境耐受性更强、存活更久，适合评价长期污染与海水、娱乐用水；大肠菌群更适合指示近期污染。
❓ 问：MPN 法与膜过滤法如何选择？
答：样品浑浊、含悬浮物多、细菌浓度低时宜用 MPN 法；样品清澈、可过滤、浓度适中时宜用膜过滤法，后者可定量计数且更快。
答：样品浑浊、含悬浮物多、细菌浓度低时宜用 MPN 法；样品清澈、可过滤、浓度适中时宜用膜过滤法，后者可定量计数且更快。
❓ 问：为什么必须做确认试验？
答：选择性培养基不能完全排除非目标菌，确认试验（如胆盐七叶苷、过氧化氢酶等）可显著降低假阳性，保证结果的准确性。
答：选择性培养基不能完全排除非目标菌，确认试验（如胆盐七叶苷、过氧化氢酶等）可显著降低假阳性，保证结果的准确性。
❓ 问：样品能保存多久？
答：应尽快分析（通常 24 h 内，冷藏），避免细菌增殖或死亡；具体时限以标准与实验室SOP规定为准，超时应注明并谨慎判读。
答：应尽快分析（通常 24 h 内，冷藏），避免细菌增殖或死亡；具体时限以标准与实验室SOP规定为准，超时应注明并谨慎判读。
❓ 问：该系列是否只适用于淡水？
答：不是。系列适用于多种水体，包括饮用水、地表水、海水与废水；海水样品需按标准进行相应稀释与培养基调整。
答：不是。系列适用于多种水体，包括饮用水、地表水、海水与废水；海水样品需按标准进行相应稀释与培养基调整。
