BS EN 01899——水质生化需氧量（BOD）测定标准系列（稀释接种法与未稀释法）

💧 BS EN 1899 是欧洲标准 EN 1899 在英国的等同采用版本，规定了水质生化需氧量（biochemical oxygen demand after n days, BODn）的测定方法。生化需氧量是衡量水中有机污染物可生物降解程度的核心指标，广泛用于污水、地表水与废水处理的监测与评估。系列按方法分两部分：第 1 部分（BS EN 1899-1:1998）规定稀释接种法（dilution and seeding method with allylthiourea addition）；第 2 部分（BS EN 1899-2:1998）规定未稀释样品法（method for undiluted samples）。两标准同时被赋予 BS 6068 系列的次级编号（BS 6068-2.63 与 BS 6068-2.64），属于水质物理、化学与生化方法系列。英国由技术委员会 EH/3（水质）下属分委员会 EH/3/2（物理、化学与生化方法）归口，ICS 分类号为 13.060.01 与 13.060.30。

💡 BOD 反映的是微生物在好氧条件下分解有机物所消耗的溶解氧量。它是一个”动态生物过程”指标，对稀释比、接种、温度与培养时间高度敏感，因此标准化的操作程序与严格的质量控制是得到可靠结果的前提。

一、标准系列构成与适用范围 📌

BS EN 1899 系列按样品是否需要稀释/接种分两部分规定测定方法，适用于各类水体与废水。英国在标准起草的投票阶段曾提出不同意见：认为应将 5 天与 7 天两种培养周期分开成独立标准，以避免引用与报告时的混淆。实际应用中必须明确培养周期（如 BOD5、BOD7），并在报告中标明。

分部	标准号	方法	适用范围
第 1 部分	BS EN 1899-1:1998（BS 6068-2.63）	稀释接种法（含烯丙基硫脲 ATU）	BOD 较高的污水、工业废水及需接种的样品
第 2 部分	BS EN 1899-2:1998（BS 6068-2.64）	未稀释样品法	BOD 较低的洁净水、地表水及可直测样品

⚠️ 标准在正式投票阶段曾收到英国的不同意见：原草案将 5 天与 7 天两种方法合并在一份标准中，英国认为应分为两个独立标准以避免引用与报告时的混淆。实际使用中应明确所采用的培养周期（如 BOD5、BOD7）。

二、第 1 部分：稀释接种法（含烯丙基硫脲）🔧

第 1 部分规定用稀释接种法测定 BODn：

原理：将样品稀释并加入接种物，在（20±1）°C 下于暗处培养 n 天（通常 5 天），测定培养前后溶解氧（DO）的差值。
烯丙基硫脲（ATU）：加入 ATU 抑制硝化作用，使测定结果主要反映碳化需氧量，避免硝化菌消耗氧造成结果偏大。
接种校正：对接种稀释水进行空白试验，从样品结果中扣除接种物自身的耗氧。
稀释比：根据样品预计 BOD 选择合适稀释倍数，保证培养后仍有足够溶解氧。

除稀释比外，样品中若存在游离氯、异常酸碱度或对微生物有毒的物质，也会干扰 BOD 测定。标准要求对样品进行必要预处理（如中和、脱氯），并在报告中记录异常情况。溶解氧测定应使用经校准的溶解氧电极或采用碘量法，保证培养前后两次测定的一致性。

三、第 2 部分：未稀释样品法 🔩

第 2 部分规定未稀释样品的 BODn 测定方法：

适用条件：适用于溶解氧含量足够、不需稀释即能测定的较洁净样品。
培养条件：与第 1 部分相同的温度、避光与培养时间要求。
结果计算：由培养前后溶解氧差值直接计算 BODn，无需稀释与接种校正。

🚨 无论采用哪种方法，都必须保证培养结束后样品中仍留有足够的溶解氧（通常不低于 1 mg/L），否则好氧分解受限、结果失真。稀释比选择不当是 BOD 测定最常见的误差来源。

四、质量控制与数据处理 🔥

BOD 测定的可靠性依赖严格的质量控制：

溶解氧测定仪器应校准，温度应控制在规定范围。
使用标准物质（如葡萄糖-谷氨酸混合液）进行质控，验证操作与接种活性。
样品应避免曝气、尽快测定，防止有机物降解导致结果偏低。
平行样、空白样与重复试验应按要求进行，结果以规定单位（mg/L）报告。

实验室还应关注接种物的活性来源：不同来源的活性污泥、河水或驯化菌种其分解能力不同，接种量应经过预试验确定，以保证耗氧过程在培养期内充分进行且不至于过快耗尽溶解氧。必要时对接种物进行驯化，使测定结果更能代表实际水体的生物降解过程。

五、工程实践应用 🛠️

在污水处理厂、环境监测站与废水排放监管中应用本系列标准时，应注意：

🔍 方法选择：根据样品类型与预计 BOD 范围选择稀释法或未稀释法。
📊 采样与保存：样品应低温保存并尽快分析，避免好氧分解与扰动。
📋 合规监测：BOD 是排放限值的重要指标，应结合 COD、TOC 等指标综合评价有机物负荷。
🔧 实验室质控：建立标准操作程序，定期用质控样校验，保证数据可比性。

六、常见问题解答 ❓

❓ 问：BOD5 和 BOD7 有什么区别？
答：BOD5 指培养 5 天测得的生化需氧量，BOD7 为 7 天。不同国家与行业标准可能采用不同周期，引用与报告时必须标明培养天数。

❓ 问：为什么要加烯丙基硫脲（ATU）？
答：ATU 可抑制硝化细菌的硝化作用，避免其耗氧干扰碳化需氧量的测定，使结果更稳定、更反映有机物的生物降解需氧量。

❓ 问：为什么必须进行接种校正？
答：接种稀释水本身含微生物与有机物，会消耗部分溶解氧。从样品结果中扣除接种空白，才能得到样品自身的 BOD。

🔍 问：稀释比如何确定？
答：根据样品预计 BOD 范围选择，保证培养后剩余溶解氧不低于规定值、且耗氧量在可测区间。必要时做梯度稀释预试验确定合适倍数。

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