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美国材料与试验协会标准 D6503‑24 规定了基于定义底底物技术(专利产品肠球菌检测试剂)检测水中肠球菌的简单程序。该标准由水专业委员会 D19.24 水微生物学分委员会负责,最初于 1999 年发布,本次为 2024 年修订版。方法采用某公司的营养指示剂,当肠球菌具有的 β‑D‑葡萄糖苷酶将底物切分时即发出荧光,可在 24 小时内报告每 100 毫升水样中最可能数(最可能数)为 1 的细菌密度。肠球菌是革兰氏阳性菌,其存在预示粪便污染及潜在肠道病原体风险,因此本方法在水质安全监测中具有重要意义。
适用范围涵盖饮用水、源水、娱乐水(淡水和海水)、废水以及瓶装水等多种水体。用户需自行验证本方法对未测试基质的有效性。标准遵循国际标准化原则,并与 D1129 术语、D1193 试剂水规范、D2777 精密度与偏倚实践以及 D3370 流动过程水采样实践等相关标准衔接。方法既可进行定性的有/无检测,也可通过特殊培养盘系统实现定量分析。
原理核心在于定义底物技术:肠球菌特有的 β‑D‑葡萄糖苷酶能专一性地水解试剂中的荧光底物,生成可被 365‑366 纳米紫外光激发的荧光物质。其他非靶标细菌因缺乏该酶而不产生荧光,从而保证检测的特异性。操作流程十分简便:取 100 毫升水样,加入一包肠球菌检测试剂粉末,混匀溶解后